返回首页 | 关于我们 | 设为主页 | 加入收藏
乐鱼官网--首页 公司简介 产品展示 新闻动态 技术专栏 在线留言 人才招聘 联系我们  
乐鱼官网苹果版 乐鱼官网苹果版
 
诊断试剂原辅料
疫苗生产原辅料
基因制药原辅料
细胞培养原辅料
微生物检测产品
常用仪器及耗材
WHO国际标准物质
 
站内信息搜索
关键字:
栏目导航:
 
技术专栏
 
免疫原的制备
发布日期:2014/10/20      浏览:2601

用为免疫动物产生抗体的抗原物质如果是人工合成的,质地比较纯,免疫动物后可获得质量好的抗血清。如果是以从组织中提取的物质作为抗原,必须经过纯化,保证提取物的纯净,才能获得质量好的抗血清。某些物质的分子量比较小,抗原性弱,属于半抗原,不易使动物产生抗体,必须把这些半抗原连接到大分子物质(载体)上,形成较为理想的免疫原,既能减少免疫注射的次数,又可节约抗原,产生良好的免疫效应,获得高质量的抗体。

(一)载体

用为作为载体的物质较多,下列几类可供选择。

蛋白质类载体:人血清白蛋白(HSA)、牛血清白蛋白(BSA)、兔血清白蛋白(RSA)、牛甲状腺球蛋白(TG)、血蓝蛋白(Hemocyanin)以及人、牛和鸡γ-球蛋白等均可作为载体。这些载体免疫活性较强,有商品供应,容易获得,即使自选提取,操作也较方便。常用的有TG、BSA、HAS等,以TG为好。

多肽聚合物:人工合成的多聚赖氨酸 、多聚谷氨酸、多聚混合氨基酸等,可与半抗原结合,所形成的免疫原可获高滴度、高亲合度的抗血清。

大分子有机化合物和某些粉末:如聚乙烯吡咯酮、羧甲基纤维素、聚甲基丙酸酯微粒、乳胶和炭末等,可吸附半抗原,也可用来作为载体,但用这类载体合成的免疫原免疫动物,所获抗血清的质量不稳定。

载体,尤其是大分子物质本身就是一种抗原,它们进行体内,可发挥致敏作用,激活免疫系统,从而使半抗原也可以使机体产生优质的抗体。因此,如果把半抗原与无免疫原性的载体结合,就不能使机体产生抗体。另外,半抗原与载体结合后,可适当延迟其降解和排出体外,从而可以发挥更久的作用。

(二)偶联剂

半抗原和载体联接,操作比较简单,在一般实验室中都可进行。但对反应条件有一定的要求:在反应过程中半抗原的免疫活性不发生改变,也不应引起载体变性到不溶解的程度。常用的方法是利用偶联剂把半抗原和载体联接起来。用作偶联剂的有碳化二亚胺类、戊二醛、二异氰酸化合物和二卤化二硝基苯等。这些偶联剂使半抗原与载体在-COOH、-NH2或-SH等基团部位发生结合。

碳化二亚胺偶联过程示意如下:

由反应过程可见,碳化二亚胺的偶联作用即可以在NH2部位发生,也可发生在羧基部位。

戊二醛所起的偶合作用与碳化二亚胺有所不同,戊二醛的两个醛基分别与载体和半抗原的-NH2结合。它起一种“桥梁”作用,而把载体与半抗原联接在一起,其反应过程为:

在免疫原的制备中,应根据不同的半抗原选用偶联剂。

(三)制备过程

以制备催产素(OT)免疫原为例:

(1)1mgOT,溶解于1ml 双蒸馏水或0.25%醋酸溶液中。10mgTG溶解于1ml 0.1mol/LPBS(pH7.5)或蒸馏水内。

(2)把OT溶液与TG溶液振荡混匀。

(3)边搅拌边滴加入0.25%戊二醛1ml。加毕后再搅拌5~10min,在室温下继续反应2~3h,就可供免疫动物用。

免疫原以新制备的为好,如果一次制备了较多的免疫原,也可保存在-40℃的低温冰箱内备用。

 
首 页     |     公司简介     |     产品展示     |     特价促销    |     新闻动态    |     技术专栏    |     在线留言     |     人才招聘     |     联系我们     |     企业邮箱
联系经理
Merck ThermoFisher Bovogen Fitzgerald biospacific bbisolutions meridianlifescience bioventix Diasource EastCoastBio mybiosource calbioreagents ProSpec Nittobo/IIC-MBC Icl medix leebio 德国progen Genwaybio Norwegian Antibodies lumigen PolyMicrospheres magsphere biorbyt southernbiotech Abcam Rabios Abbexa Sdix Capricorn Apollo OXOID acros SERVA Seramun cygnustechnologies generalchemical ChemTrade Pharmacosmos Corning Axygen nibsc NIST IRMM标准品 edqm JCCRM
联系经理
©2012 北京乐鱼官网科技有限公司 Tel:010 5701 7625/8690/8691 Fax:010 8174 3370 MP:136 4103 4192 Mail:info@losblabla.com 京ICP备15009805号-1